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左氧氟沙星体外诱导铜绿假单胞菌外排泵耐药和交叉耐药机制研究

王碧浪  金秀萍  王家学  
【摘要】:目的 研究左氧氟沙星(LEV)体外诱导铜绿假单胞菌(PA)外排泵耐药和交叉耐药的机制。方法 多步诱导法进行铜绿假单胞菌体外LEV诱导耐药试验,倍比稀释法测定诱导成功菌株诱导前后对LEV、环丙沙星(CIP)、司帕沙星(SPX)和加替沙星(GAT)的最小抑菌浓度(MIC)。用外排泵抑制剂(PaβN)筛选主动外排表型阳性菌株,PCR扩增诱导成功菌株外排泵MexAB-Opr M相关基因mex B、opr M和mexR,mexR基因扩增产物测序分析。结果 12株铜绿假单胞菌诱导出稳定的左氧氟沙星耐药株,且对CIP、SPX和GAT产生不同程度的交叉耐药。7株诱导成功菌株主动外排表型阳性。PCR扩增mex B、opr M和mexR基因5株外排表型阴性菌株均阴性,7株外排表型阳性菌株中5株mex B、opr M和mexR均阳性、1株仅opr M基因阳性,mexR基因PCR产物测序结果与Gen Bank(NC_002516)公布mexR基因比对,4株出现基因缺失、插入或替换突变,1株同源性为100%。结论 左氧氟沙星可诱导铜绿假单胞菌产生获得性耐药,其耐药机制与主动外排相关。
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